大肠杆菌培养步骤方法大致如下：
1.准备培养基：大肠杆菌通常在LB（Luria-Bertani）培养基中生长良好，可以选择购买已经配好的LB培养基或自行配制。
2.接种培养基：将已经处理好的大肠杆菌进行接种，可以采取挑菌、滴菌、扩菌等不同的接种方法。
3.培养条件：将接种好的菌液在37℃恒温摇床上进行培养，一般需要培养12-18小时，直到培养物中的细菌数量增加到一定程度。
4.检测菌液状态：使用光学显微镜检测培养液状态，观察大肠杆菌细胞的状态、形态等特征。
5.采集菌液：在培养物增殖到一定程度后，采集大肠杆菌菌液，可以进行下一步的实验、分离、纯化等操作。
注意事项：
1.准备培养基、接种菌液、培养条件等操作要严格遵循无菌操作规程，防止外界污染。
2.在培养过程中要根据实验需要不断调整培养条件，如温度、盐度等，以期获得更好的生长效果。
3.在处理大肠杆菌菌液时，一定要注意安全防护，避免对人体造成危害。
