微生态失衡与炎症性肠病

　　多项IBD患者肠道菌群的分析研究具有一些共同特征。早期研究采用粪便培养、细菌分离技术发现CD、UC和袋囊炎患者厌氧菌浓度增加,而对照组不增加。研究还发现CD患者E.coli数量增加,而CD、UC和袋囊炎患者肠道益生菌数量明显减少。

　　目前,肠道菌群研究存在以下问题:第一,大多数研究虽然采用细菌生物学技术如聚合酶链反应(PCR)、原位杂交、流式细胞术、DNA探针微序列测定以及基因芯片分析技术等,但不可能完成庞大的肠道细菌研究,仅能分离约30%的肠道菌群。16SrRNA探针技术有望提高细菌检测率。第二,CD患者肠道细菌种类繁多,多属于不正常菌属。即使是正常个体也有多达70%的肠道细菌未能分类。所以哪些菌种与IBD的关系密切尚不清除。第三,应该区分肠黏膜菌丛和粪便菌丛,因为两者的菌种完全不同。它们之间的差异在IBD发病中可能具有重大意义。推测IBD与针对黏膜相关细菌的免疫应答反应失调有关。IBD患者粪便培养和肠黏膜菌群分析显示厌氧菌和E.coli菌比例显著增加,而双歧杆菌比例显著降低。Schultsz等采用16SrRNA探针技术结合原位非荧光杂交技术发现,大部分UC肠黏膜增加的细菌定植于直肠黏膜层。Swidsinski等研究了UC和CD稠厚黏膜层细菌,发现黏膜细菌浓度CD高于UC,回肠高于结肠。通过同步细菌群分析、并用定量PCR技术以及荧光原位杂交技术分析发现50%的CD主要菌种为E.coli或拟杆菌。Kleessen等用16SrRNA探针发现UC与CD存在不同的肠黏膜相关菌种。Schultsz等及Swidsinski等在对照组样本中却未发现细菌定植,也未发现入侵细菌与黏膜炎症程度之间的相关性。相反,Kleesen等研究却发现对照样本中细菌种类增加,且黏膜炎症愈重,细菌种类愈多。各家研究结果的不同原因可能是病例选择不同、以及采用的研究手段不同所致。

　　为了解肠黏膜免疫系统对细菌的免疫反应,对IBD患者肠黏膜组织和血清学的特异性抗体和T细胞亚系进行了研究.Furrie等对从IBD分离的35种肠道细菌的免疫反应进行了同步定量分析研究,结果UC对消化链球菌属非产气菌的免疫反应产生的抗体明显增高,而与此对应的是结肠黏膜中消化链球菌属非产气菌数量也增加。同样,Landers等进行了一项CD大样本研究,目的是探讨选择性细菌抗原和免疫反应的一致性,发现对4种细菌抗原的血清学反应的比例和类型不同,故推测这些抗体与黏膜细菌的组成以及微生态失衡情况呈对应关系。

　　益生菌和益生元IBD的研究方兴未艾。动物模型的研究阐明了共生菌对黏膜免疫功能和黏膜完整性的作用。但是目前尚无好的随机对照临床实验应用于IBD。以往研究曾将袋囊炎作为微生态失衡的指标,VSL#3可预防袋囊炎的发生和发展及CD袋囊炎的复发。

　　“有害菌”加重IBD炎症和“有益菌”减缓炎症保护黏膜的作用机制现在还不清除。拟杆菌和梭状菌属菌种具有产生肠毒素及水解蛋白的特性,使黏膜通透性加大,细菌繁殖增多。UC和袋囊炎患者细菌代谢产生的硫化物具有害作用。硫化氢可阻止肠上皮细胞利用短链脂肪酸,而短链脂肪酸是结肠细胞的营养物质。然而,DSS结肠炎模型显示硫化物在发病中并未起重要作用。另外一些研究将兴趣集中在探究肽聚糖、脂多糖和细菌CpGDNA上。研究发现具有黏附力和侵袭力的E.coli常定植于CD的回肠病变部位。这些细菌似乎具有各种毒力,如定植肠黏膜的能力、穿过上皮屏障的能力、与上皮内巨噬细胞相互作用的能力,以及诱导感染的上皮细胞和巨噬细胞合成促炎因子的能力等。